Gateway技術(shù)提供以下可能： 通過(guò)去除冗長(zhǎng)的亞克隆步驟節(jié)省您的時(shí)間 同時(shí)將您的基因轉(zhuǎn)移到多個(gè)表達(dá)系統(tǒng) 在任何您選擇的系統(tǒng)――體外，細(xì)菌，酵母，昆蟲(chóng)，或哺乳動(dòng)物――分析表達(dá) 一、一種更好的克隆方法 Gateway技術(shù)能夠克隆一個(gè)或多個(gè)基因進(jìn)入到任何蛋白表達(dá)系統(tǒng)（圖1）。這項(xiàng)強(qiáng)大的體外技術(shù)大大地簡(jiǎn)化了基因克隆和亞克隆的步驟，而同時(shí)典型的克隆效率高達(dá)95%或更高。當(dāng)Gateway技術(shù)提供以下可能： 通過(guò)去除冗長(zhǎng)的亞克隆步驟節(jié)省您的時(shí)間

同時(shí)將您的基因轉(zhuǎn)移到多個(gè)表達(dá)系統(tǒng)

在任何您選擇的系統(tǒng)――體外，細(xì)菌，酵母，昆蟲(chóng)，或哺乳動(dòng)物――分析表達(dá)

一、一種更好的克隆方法

Gateway技術(shù)能夠克隆一個(gè)或多個(gè)基因進(jìn)入到任何蛋白表達(dá)系統(tǒng)（圖1）。這項(xiàng)強(qiáng)大的體外技術(shù)大大地簡(jiǎn)化了基因克隆和亞克隆的步驟，而同時(shí)典型的克隆效率高達(dá)95%或更高。當(dāng)基因在目的表達(dá)載體之間快速簡(jiǎn)便的穿梭時(shí)，還可以保證正確的方向和閱讀框。Gateway也有助于進(jìn)行帶不同數(shù)目純化和檢測(cè)標(biāo)簽蛋白的表達(dá)。

圖1 Gateway技術(shù)的靈活性

目的基因克隆進(jìn)入門(mén)載體后，可以同時(shí)轉(zhuǎn)移目的基因到多個(gè)目的載體。

Gateway利用了位點(diǎn)特異重組，所以在構(gòu)建入門(mén)載體后，不再需要使用限制性?xún)?nèi)切酶和連接酶。一旦您擁有了一個(gè)入門(mén)克隆，就可以多次使用它，轉(zhuǎn)移您的目的基因到Gateway改造過(guò)的各種表達(dá)載體（目的載體）。

此外，由于在重組時(shí)dna片段的閱讀框和方向保持不變，因而您不必再為新的表達(dá)克隆測(cè)序擔(dān)心。在使用每一種新的表達(dá)系統(tǒng)時(shí)，將會(huì)節(jié)省您更多的時(shí)間。

二、一項(xiàng)強(qiáng)大而可靠的技術(shù)

Gateway技術(shù)是克隆和亞克隆DNA序列的一項(xiàng)新穎的通用系統(tǒng)，便于功能基因的分析和蛋白質(zhì)的表達(dá)。一旦進(jìn)入這個(gè)多功能的操作系統(tǒng)，DNA片段可以通過(guò)位點(diǎn)特異的重組在載體之間轉(zhuǎn)移。

Gateway技術(shù)是基于已研究的非常清楚的λ噬菌體位點(diǎn)特異重組系統(tǒng)（attB x attP →attL x attR）。BP和LR兩個(gè)反應(yīng)就構(gòu)成了Gateway技術(shù)（表1和圖2）。BP反應(yīng)是利用一個(gè)attB DNA片段或表達(dá)克隆和一個(gè)attP供體載體之間的重組反應(yīng)，創(chuàng)建一個(gè)入門(mén)克隆。LR反應(yīng)是一個(gè)attL入門(mén)克隆和一個(gè)attR目的載體之間的重組反應(yīng)。LR反應(yīng)用來(lái)在平行的反應(yīng)中轉(zhuǎn)移目的序列到一個(gè)或更多個(gè)目的載體。